Государственная фармакопея Республики Беларусь -
Скачать (прямая ссылка):
При получении рабочей культуры, используемой при проведении испытания, число пересевов, произведенных от исходного штамма, не должно превышать пяти.
Среды являются пригодными при условии наличия четкого визуально наблюдаемого роста микроорганизмов.
Таблица 2.6.1.-1
Штаммы тест-микроорганизмов, пригодные для испытаний питательных сред
Аэробные бактерии
Staphylococcus aureus АТСС 6538, CIP 4.83, NCTC 10788, NCIMB 9518, #TCC
6538-P
Bacillus subtilis АТСС 6633, CIP 52.62, NCIMB 8054
Pseudomonas aerugi АТСС 9027, NCIMB 8626, CIP 82.118
nosa
Анаэробные бактерии
Clostridium sporogenes АТСС 19404, CIP 79.3, NCTC 532, ATCC 11437, # ГИСК
272
Грибы
Candida albicans АТСС 10231, IP 48.72, NCPF 3179, # АТСС 885-653
Aspergillus niger АТСС 16404, IP 1431.83, IMI 149007, # ВКМ F-1119
ПРОВЕРКА ПРИГОДНОСТИ МЕТОДИКИ ИСПЫТАНИЯ
Проверку методики испытания выполняют в соответствии с нижеприведенным описанием теста на стерильность испытуемого продукта с использованием в точности аналогичного метода со следующими модификациями.
Мембранная фильтрация. После переноса содержимого испытуемого контейнера или контейнеров на мембрану заключительную порцию стерильного растворителя, используемого для промывки фильтра, инокулируют небольшим коли-
чеством жизнеспособных микроорганизмов (не более 100 колониеобразующих единиц).
Прямая инокуляция. После внесения в питательную среду содержимого испытуемого контейнера или контейнеров ту же среду инокулируют небольшим количеством жизнеспособных микроорганизмов (не более 100 колониеобразующих единиц).
В обоих случаях используют штаммы микроорганизмов, приведенные выше, в описании испытания питательных свойств в отношении аэробов, анаэробов и грибов. За положительный контроль принимают результаты испытания питательных свойств используемых сред. Все контейнеры, содержащие среду, инкубируют не более 5 дней.
Если после периода инкубации ясно наблюдается рост микроорганизмов, визуально сравнимый с ростом в контрольном сосуде, не содержащим испытуемого продукта, делают вывод, что либо продукт в условиях испытания не обладает антимикробной активностью, либо такая активность была в достаточной степени исключена. В таком случае испытание на стерильность может проводиться без дальнейших модификаций.
Если после периода инкубации не наблюдается роста микроорганизмов, визуально сравнимого с ростом в контрольном сосуде, не содержащим испытуемого продукта, делают вывод, что продукт обладает антимикробной активностью, которая в условиях испытания не была в достаточной степени исключена. Условия подвергают модификациям с целью исключения антимикробной активности и повторяют испытание на пригодность.
Это испытание следует проводить в следующих случаях:
а) когда проводится испытание на стерильность новой продукции,
б) при внесении любых изменений в экспериментальные условия испытания.
Проверка пригодности может выполняться одновременно с контролем стерильности испытуемой продукции.
# Частные фармакопейные статьи должны содержать сведения о наличии антимикробного действия продукта и рекомендации по его устранению.
ИСПЫТАНИЕ НА СТЕРИЛЬНОСТЬ ТЕСТИРУЕМОГО ПРОДУКТА
Испытание может быть выполнено с использованием метода мембранной фильтрации или путем прямой инокуляции питательной среды испытуемым продуктом. Должны проводиться соответствующие отрицательные контрольные опыты. В тех случаях, когда позволяет природа продукта (фильтруемые водные препараты, спиртовые или масляные препараты, а также препараты, смешиваемые или растворимые в водных или масляных растворителях, не обладающих антимикробным эффектом в условиях испытания), следует предпочитать метод мембранной фильтрации.
Мембранная фильтрация. Используют мембранные фильтры с номинальным размером пор, не превышающим 0,45 мкм, с установленной способностью к удерживанию бактерий. Например, фильтры на основе нитрата целлюлозы используют для водных, масляных и разбавленных спиртовых растворов, а фильтры на основе ацетата целлюлозы - в частности, для растворов с высоким содержанием спирта. Для некоторых видов продукции, например, для антибиотиков, могут потребоваться специально подготовленные фильтры.
В нижеописанном методе предполагается использование мембран диаметром около 50 мм. При использовании фильтров других диаметров объемы разведений и промывок должны быть изменены соответствующим образом. Аппарат для фильтрации и мембрану стерилизуют подходящим способом. Конструкция аппарата должна обеспечивать введение и фильтрацию испытуемого раствора в асептических условиях, извлечение мембраны для ее переноса в питательную среду или проведение инкубации после помещения питательной среды в аппарат.
